Page 28 - Fen Lisesi Biyoloji 12 | 1. Ünite

1. Genden Proteine Genden Proteine 1.
Ünite Ünite

maktadır. Metot basitçe, nükleik asitlerin tüp içerisinde uygun koşullarda çoğaltılması esasına dayanır. DNA’nın iki
zincirini bir arada tutan hidrojen bağları, ortam sıcaklığında değişiklikler yapılarak kırılabilir ve tekrar birleştirilebilir.
DNA’nın bu özelliği PCR’nin yapılmasına olanak sağlar. PCR, 3 aşamada gerçekleşir.
1. Çoğaltılmak istenen DNA’nın yüksek sıcaklıkta (çoğunlukla 95 ºC) hidrojen bağları zayıflatılarak denatürasyo-
nu sağlanır. Sonra genellikle 50-55 ºC civarına soğutulur.
2. Primerler, ayrılmış olan DNA parçalarına bağlanır.
3. DNA polimeraz, DNA sentezine başlayarak zincirlerin geri kalan bölümlerinde tamamlayıcı olan yeni zincirleri
oluşturur. Bu süreç çoğunlukla 72 C’de yürütülür (Görsel 1.52).
o

Kalıp DNA

1.Aşama
DNA zincirlerinin ayrılması
95 C
0

2. Aşama
Primer bağlanması
(50-54 C’de 1 dakika)
0

3. Aşama
Yeni zincir sentezi
(72 C’de 2 dakika)
0

Görsel 1.52: Polimeraz zincir reaksiyonu

PCR yönteminin gelişmesinde en büyük katkıyı Thermus aquaticus (Termus akuatikus) bakterisinden izole edilen
Taq DNA polimeraz enziminin bulunması yapmıştır. Çünkü bu enzim, yüksek sıcaklıklara dayanabilen bir enzimdir.
PCR yaygın olarak tıbbî ve biyolojik araştırma laboratuvarlarında kalıtsal hastalıkların teşhisi, genetik parmak izle-
rinin tanımlanması, İnsan Genom Projesi ve diğer genom projelerinde, genlerin klonlanması, babalık testi ve DNA
hesaplaması gibi değişik konularda yaygın bir şekilde kullanılmaktadır.

40